Faktory, ktoré ovplyvňujú rozlíšenie chromatografickej kolóny, sú typ a vlastnosti stacionárnej fázy (veľkosť častíc, rozloženie veľkosti častíc atď.), podmienky balenia, dĺžka kolóny, typ a prietok mobilnej fázy a vlastnosti látok používaných na meranie účinnosti kolóny. podrobnosti takto:
(1) Chromatografická dĺžka a vlastnosti plniva, čím dlhšia je chromatografická kolóna, tým lepšia je analýza medzi komponentmi, ale čím dlhšia je chromatografická kolóna, tým väčší je pokles tlaku a vstupný tlak je obmedzený. Ak je kolóna príliš dlhá, pomer tlaku vstupu a výstupu sa zvýši, čo ovplyvní oddelenie chromatografických píkov;
(2) Hlavným faktorom je aj veľkosť častíc chromatografického stĺpca. Čím je jemnejšie častice, tým lepšie je rozlíšenie v dôsledku zvýšenia povrchovej plochy, ale jemnejšie častice zvýšia pokles tlaku v kolóne, čo bude mať tiež nepriaznivý účinok;
(3) Teplota kolóny má tiež veľký vplyv na analýzu kvapalinového chromatografu, pretože rozpustnosť plynu v kvapaline alebo stupeň adsorpcie na pevnom povrchu klesá so zvýšením teploty. V plynovo-kvapalinovej chromatografickej analýze, keď teplota prekročí určitú teplotu, sa statické kvapaliny zvyčajne odparujú zo kolóny, takže pri výbere teploty kolóny by sa mal zvážiť bod varu vzorky. Vo všeobecnosti je o niečo nižšia ako priemerná hodnota bodu varu vzorky;
(4) Vplyv typu nosného plynu plynového chromatografu. Bežne používané nosné plyny sú N2, H2, He, Ar atď. Medzi nimi je molekulová hmotnosť plynu H2 a He malá, čo vedie k zlepšeniu rýchlosti analýzy, ale médium s vyššou koncentráciou sa v ňom ľahko vytvára difúzia, čo ovplyvňuje stupeň separácie, takže pri skutočnom meraní sa stredné H2 a He plyny vo všeobecnosti používajú v oblastiach s nízkou strednou koncentráciou a zvyšujú ich prietok na zníženie vplyvu difúzie. Výhody plynov s väčšími molekulovými hmotnosťami, ako sú N2 a Ar, spočívajú v tom, že difúzne účinky sú malé a nevýhodou je, že pokles tlaku v kolóne je veľký a prietok je pomalý, to znamená, že doba analýzy je dlhá;
(5) Vplyv prietoku nosného plynu. Doba pobytu média na stacionárnej fáze závisí hlavne od charakteristík samotného média (volatilita, polarita atď.) a prietoku nosného plynu. Preto rýchlosť prietoku priamo ovplyvňuje stupeň oddelenia;
(6) Vplyv času vstrekovania a objemu injekcie. Doba vpichu by mala byť čo najkratšia. V zásade okamžitá injekcia zlepší rozlíšenie. Objem injekcie by mal byť čo najmenší, ale mal by byť identifikovateľný detektorom.
Preto je možné dosiahnuť zlepšenie rozlíšenia chromatografickej kolóny zvýšením dĺžky kolóny, znížením objemu vstrekovania, znížením prietoku nosného plynu, znížením teploty chromatografickej kolóny, zvýšením teploty odparovacej komory a znížením mŕtveho objemu systému.